產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION產(chǎn)品中心/ products
簡要描述:高效脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑U-300 細胞培養(yǎng)UBI轉(zhuǎn)染試劑U-300 (U-300 Transfection Reagent)是在前幾代轉(zhuǎn)染試劑基礎上,再次創(chuàng)新包含最為良好的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù),追求更優(yōu)良的轉(zhuǎn)染性能,此試劑具有優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率,并可提高細胞活性,廣泛適用于難轉(zhuǎn)染的及常見的細胞種類(例如HEK 293和Hela細胞)。
品牌 | YOBIBIO/攸碧艾 | 貨號 | U33-300B |
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規(guī)格 | 0.75ml | 供貨周期 | 一周 |
主要用途 | 細胞轉(zhuǎn)染 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
產(chǎn)品特點:
提供優(yōu)良的性能,以針對難轉(zhuǎn)染的細胞系實現(xiàn)了較高轉(zhuǎn)染效率的試劑
轉(zhuǎn)染試劑對細胞作用溫和,毒性很低
相比其他轉(zhuǎn)染試劑具有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的用量 適用細胞更加廣泛,有效轉(zhuǎn)染難于轉(zhuǎn)染的細胞系
能有效轉(zhuǎn)染的細胞類型包括:
肺癌細胞(A549、NCI-H460)骨肉瘤細胞(U-2 OS、Saos-2)
結(jié)腸癌細胞(Caco2、SW480)胰腺癌細胞(PANC-1)
皮膚黑色素瘤細胞(SK-MEL-28)成纖維細胞(3T3、COS-7)
肝細胞(HepG2、HuH7)紅白血病細胞(K562)
乳腺癌(MCF7、Hs578T)前列腺癌(LNCap)
成肌細胞(C2C12、L6 CRL-1458)
產(chǎn)品規(guī)格:
(備注:以下為常用規(guī)格,更多規(guī)格可根據(jù)客戶需求定制)
儲存事項: 冰袋或者濕冰運輸,短時間內(nèi)可室溫運輸,但需避免光源熱源。
長時間儲存于 4℃,切勿凍存,有效期24個月。
產(chǎn)品用于:僅供研究使用,不適用于人或動物的體外診斷與治療。
由于實驗受多種因素影響具有不確定性,本說明書操作說明僅供參考,最終解釋權(quán)歸本公司所有。
警告!產(chǎn)品對人體危害性未知,請遵循操作說明。穿戴適當?shù)姆雷o眼鏡、衣服和手套!如果不小心接觸,應立即用大量的水沖洗,如引起身體不適應前往醫(yī)院治療。
注意事項: 轉(zhuǎn)染siRNA至細胞時,遵循如上所述的DNA實驗方案,但在稀釋siRNA 時不要加入 B-300試劑。在無血清培養(yǎng)基中制備 DNA-U33-300復合物,直接將其加入含細胞培養(yǎng)基的細胞中。(有無血清或抗生素均可 ) 轉(zhuǎn)染后無需去除轉(zhuǎn)染復合物或者更換/添加培養(yǎng)。 整個實驗過程避免細胞污染,由于不同細胞耐受性不同,我們建議您在做批量實驗前,可根據(jù)實際質(zhì)粒和細胞的轉(zhuǎn)染效率,分不同梯度量先做預實驗,摸索良好DNA和U33-300 Transfection Reagent的混合比例。步驟里面測試推薦的兩種濃度的并非固定濃度,優(yōu)化后可根據(jù)自身細胞情況調(diào)整用量。
操作步驟:
(以六孔板的貼壁細胞DNA轉(zhuǎn)染為例) 細胞準備。
1.轉(zhuǎn)染前一天將細胞接種至六孔板內(nèi),細胞接種數(shù)量視其生長速度和細 6 胞系類型而定,一般為0.5-1×10 個細胞。
2.轉(zhuǎn)染時要求細胞生長的匯合度為70~90%,轉(zhuǎn)染前兩小時對細胞進行換液。(細胞狀態(tài)與轉(zhuǎn)染效果影響很大,選擇良好的細胞狀態(tài)更有利于轉(zhuǎn)染效率提高和轉(zhuǎn)后細胞狀態(tài)的恢復) 將3.75 μl和7.5 μl 的U33-300分別加至另外125 μl無血清的OPTI-MEM培 養(yǎng)基中,輕輕混勻,室溫靜置2-3分鐘。
3. 將5 ug 質(zhì)粒DNA (0.5-5μg/μL) 加入到250μl無血清OPTI-MEM培養(yǎng)基稀釋,制 DNA 預混液勻,然后添加10 ul B300 試劑并充分混勻。
4.在每管已稀釋的U-300試劑中加入等體積稀釋的 DNA孵育10-15分鐘。
5.將DNA和U33-300混合液滴加至六孔板的孔內(nèi),前后左右晃動孔板混勻,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
6.轉(zhuǎn)染18-48小時后,倒置熒光顯微鏡下觀察熒光蛋白表達,或加入抗性培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定表達細胞系單克隆。
用量參照表:
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